生物素-亲和素偶联探针蛋白芯片检测技术-论文-万方医学网

生物素-亲和素偶联探针蛋白芯片检测技术

A Novel Protein Microarray Detection Technique Based on Biotin-Avidin Conjugation Probe

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摘要：

自行制备一种新型生物素-亲和素偶联探针分子并用于反相蛋白芯片的检测.首先,将生物素-羊抗鼠IgG与亲和素按照不同比例混合后与鼠IgG蛋白芯片反应,观察荧光信号的放大情况;然后以鼠IgG-羊抗鼠IgG体系为研究模式,对反相蛋白芯片的制备条件进行了考察和优化,包括荧光分子的非特异性吸附,点样缓冲液的选择以及蛋白的活性等.最后,采用此偶联探针对反相蛋白芯片进行了检测.结果表明,BSA缓冲液制备的反相蛋白芯片可以防止非特异性吸附,并有利于保持固定蛋白活性和提高检测限;另外,与传统的与生物素-亲和素检测技术相比,采用生物素-亲和素偶联探针对反相芯片的检测限可以提高4倍左右.表明亲和素-生物素偶联探针成本低、易于合成、并可以与其它的信号放大技术联用进一步提高检测的灵敏度,有望用于蛋白质芯片的检测.

作者： 孙志丹 ^[1] 于晓波 ^[2] 赵天明 ^[3] 袁宏坤 ^[1] 何为 ^[1] 许丹科 ^[1]

作者单位： ^[1] 蛋白质组学国家重点实验室,北京蛋白质组研究中心,蛋白质组新技术研究室,北京,102206 ^[2] 军事医学科学院放射与辐射医学研究所,生物化学研究室,北京,100850 ^[3]

期刊：《生物工程学报》2008年24卷3期 515-520页 MEDLINEISTICPKUCSCD

关键词：生物素-亲和素系统信号放大反相蛋白芯片

主题词：蛋白(Egg White)生物素(Biotin)小鼠(Mice)荧光(Fluorescence)吸附(Adsorption)

分类号： Q5

栏目名称： 技术与方法

DOI： 10.3321/j.issn:1000-3061.2008.03.028

发布时间： 2008-05-26

基金项目：

国家重点基础研究发展计划(973计划)

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被引：7
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