高通量筛选雌激素类化合物重组绿色荧光蛋白酵母细胞测评体系
Bioassay of Recombinant Green Fluorescent Protein Gene Yeast Cell for a High Throughput to Screen Estrogenic Compounds
以载体双表达的方式构建重组酵母环境雌激素的评价体系,用于快速筛选雌激素类化合物.在表达载体中,用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子驱动α人雌激素受体基因(hERα)的表达;在报告载体中,用雌激素效应元件(ERE)调控的绿色荧光蛋白(yEGFP)作为报告基因.将两者转化于酵母细胞(W303-1A)中,构建成重组绿色荧光蛋白酵母细胞.该酵母细胞经不同浓度的雌激素类化合物作用后,发现GFP的表达量与此类受试物具有明显的剂量效应关系.与其他环境雌激素酵母评价体系相比,该重组酵母评价细胞,在应用时不需要破坏细胞壁,也不需要底物和相关试剂,可直接在96孔板中操作完成,具有快速,高通量、敏感性高、重现性好及廉价等特点.
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