换一批人乳头瘤病毒16亚型L1蛋白在多形汉逊酵母中的优化表达
Optimized expression of the L1 protein of human papillomavirus in Hansenula polymorpha
摘要为了实现人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)16亚型衣壳蛋白L1在多形汉逊酵母(Hansenulapolymorpha)中的高效表达,根据L1蛋白的氨基酸序列及多形汉逊酵母的密码子偏爱性,对L1蛋白的编码序列进行优化设计,合成了完整的编码序列,命名为HPV16L1.以甲醇诱导型启动子MOXp和终止子AOXTT为表达调控元件,以尿嘧啶合成相关基因URA3为筛选标记,构建了HPV16L1的重组表达质粒pYMOXU-HPV16.用SacⅡ酶切质粒pYMOXU-HPV16使其线性化,电转化多形汉逊酵母菌株H-ura3,依据营养缺陷互补筛选重组菌株.通过PCR扩增及HPV16 L1蛋白表达量分析表明已获得稳定高表达L1蛋白的重组汉逊酵母菌株HP-U-16L.摇瓶发酵条件的初步优化表明,以YPM(pH 7.0)为基础培养基进行诱导培养,控制接种量使初始培养液OD600为1.0,每隔12 h补加甲醇至终浓度为1%(V/V),37℃、200 r/min条件下诱导培养72 h后,HPV16 L1蛋白的最高表达量为78.6 mg/L.本研究为多形汉逊酵母源HPV16 L1疫苗的研制奠定了基础.
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关键词
人乳头瘤病毒16亚型衣壳蛋白L1多形汉逊酵母优化表达human papilomavirus16 L1 proteinHansenula polymorphaoptimized expression
分类号
R73
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1000-3061.2009.10.011
发布时间
2010-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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