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慢病毒载体感染成年食蟹猴骨髓间充质干细胞

Improving infection efficiency of adult cynomolgus monkey mesenchymal stem cells with lentiviral vectors

摘要骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)具有增殖和多向分化潜能,临床应用广泛,近年来备受关注.另一方面,MSCs易于转导和表达外源基因,是理想的基因工程细胞.非人灵长类(NHPs)和人类具有非常相近的遗传背景,NHPs模型在评价药物疗效和移植治疗等方面具有不可替代的价值.本研究采用密度梯度离心法分离成年食蟹猴骨髓单核细胞(Marrow mononuclear cells,MNCs),贴壁培养MSCs.同时构建表达绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的慢病毒载体,感染成年食蟹猴MSCs.结果显示,体外培养的成年食蟹猴MSCs均感染猴泡沫病毒(Simian foamy virus,SFV),体外培养成年食蟹猴MSCs必须添加抗病毒药物Tenofovir.但由于食蟹猴MSCs感染SFV,以及培养中添加了抗病毒药物Tenofovir,慢病毒载体的感染效率明显降低(＜10%).本研究通过停用抗病毒药,在细胞复苏后6 d转染慢病毒,可大幅提高慢病毒的感染效率(＞50%).为成年食蟹猴MSCs作为基因工程细胞应用于实验和临床研究提供了技术保证.