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为拓宽白菜育种的基因资源,改良白菜品质,以白菜(Brassica campestris,2n=20,AA)和甘蓝(B.oleraceaL.var.capitata,2n=18,CC)的子叶和下胚轴为材料分离、制备原生质体.采用40％聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)进行原生质体融合.融合细胞在以0.3 mol/L蔗糖、0.3 mol/L葡萄糖为渗透稳定剂,附加1.0 mg/L 2,4-D+ 0.5 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+ 0.1 mg/L 1-萘乙酸(NAA)+1.0 mg/L激动素(Kinetin,Kin)的改良K8p培养基中培养并诱导细胞分裂.小愈伤组织经增殖培养后在MS+ 0.2 mg/L玉米素(Zeatin,ZEA)+1 mg/L 6-BA+ 0.5 mg/L Kin+ 0.4 mg/L NAA的固体分化培养基上诱导出不定芽.30d后再转入MS基本培养基,获得完整的再生植株.将生根的植株转移到花盆,并对其杂种性质进行形态学、细胞学和分子生物学鉴定.结果表明,经细胞融合分裂出的320个愈伤组织中,获得了35棵再生植株,其再生率达10.94％.形态学观察显示,绝大多数再生植株的叶面积较大,株型和叶型为两种杂交亲本的中间型,部分植株的叶片浓绿、肥厚.染色体计数结果显示,36.4％的再生植株染色体数为2n=38；36.4％的再生植株的染色体数为2n=58～60；27.2％的再生植株的染色体数为2n=70～76,超过两个融合亲本的染色体数的总和.流式细胞仪测定DNA含量显示,再生植株DNA含量变化比较大,其结果与染色体鉴定结果相吻合.随机扩增多态性DNA (Random amplified polymorphic DNA,RAPD)和基因组原位杂交(Genomic in situ hybridization,GISH)分析结果证明再生植株具有双亲基因组.体细胞杂种花粉育性比较低,杂交、回交后其育性逐渐获得恢复,与白菜回交后代逐渐恢复了育性.通过体细胞杂交和回交、杂交获得了形态变化广泛的个体,为白菜的品种育种提供多样的种质资源.