换一批摘要与转基因方法相比,基因瞬时表达系统在基因表达研究上具有快速便捷的特点.为检验水稻miRNA与靶标基因之间的调控关系,将MIRNA基因与GFP/靶标序列融合基因(或GFP/靶标突变序列融合基因)构建在同一瞬时表达载体上,并转化水稻原生质体,通过观察含有GFP/靶标序列融合基因和GFP/靶标突变序列融合基因的载体之间的荧光强度差异,以及通过qRT-PCR方法检测靶标和非靶标mRNA水平差异来验证miRNA对靶标基因的调控.用osaMIR156和osaMIR397及其靶标序列对实验设计方法进行验证,荧光显微观察和qRT-PCR检测证明,osamiR156和osamiR397能降低相应靶标序列GFP融合基因的转录物水平和GFP荧光水平.此种水稻原生质体瞬时表达方法用于在体内进行大规模miRNA靶标基因检测.由于其他近缘单子叶植物很可能与水稻有近似的小RNA加工系统,因此对于其他单子叶植物miRNA功能研究也将有很好的应用前景.
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10.13345/j.cjb.140081
发布时间
2015-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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