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人α1,2岩藻糖苷转移酶基因在猪动脉内皮细胞的表达

Transgenic expression of human α1 ,2-fucosyltransferase (HT) in porcine arterial endothelial cells

摘要:

目的通过基因工程技术使人α1,2岩藻糖苷转移酶(HT)基因在猪动脉内皮细胞(PAEC)表达,削减异种抗原α-Gal的表达.方法构建pcDNA3-HTcDNA重组质粒,体外培养PAEC,脂质体转染法将pcDNA3-HTcDNA转染PAEC,新霉素(G418)筛选具有抗性的细胞克隆,对其用PCR检测重组质粒的整合,流式细胞术(FCM)检测转染细胞H抗原和异种抗原α-Gal的表达.分别以未转染的PAEC和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为对照.结果重组质粒转染PAEC经筛选得到抗性细胞克隆,PCR扩增出人HT基因片段,FCM检测转染细胞H抗原表达升高,α-Gal表达明显降低.结论成功构建了pcD-NA3-HTcDNA重组质粒,并使人HT基因在PAEC表达,抑制了α-Gal的合成.

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作者: 马志方 [1] 李胜芝 [1] 刘秉乾 [1] 张玥 [1] 王广有 [1] 马腾骧 [1]
作者单位: 天津市泌尿外科研究所,天津,300211 [1]
分类号: Q78
栏目名称: 基础医学
DOI: 10.3969/j.issn.1007-6611.2005.02.007
发布时间: 2005-05-26
基金项目:
天津市科委科研项目
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