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STF-31对风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

Effect of STF-31 on apoptosis and expression of related proteins in RAFLS cells

摘要:

目的 观察STF-31对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RAFLS)的增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 不同浓度的STF-31(0,1,2,4,8μmol/L)分别处理RAFLS细胞24,48,72 h,0μmol/L组为空白对照组.用MTT法检测STF-31对RAFLS细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜观察STF-31作用后的RAFLS细胞形态学变化;ATP检测试剂盒分析STF-31作用后的RAFLS细胞内ATP水平;JC-1检测试剂盒检测给药后RAFLS细胞内线粒体膜电位的变化;流式细胞术(Annexin V-FITC/PI)双染法分析不同浓度STF-31(0,2,4,8μmol/L)作用RAFLS细胞48 h的细胞凋亡比率;Western blot法检测STF-31作用于RAFLS细胞后凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p-Akt的表达. 结果 STF-31可以浓度和时间依赖性地抑制RAFLS细胞的增殖(P<0.05),作用RAFLS细胞24,48,72 h的IC50值分别为9.96,1.38,0.50 μmol/L.倒置显微镜下观察到STF-31作用于RAFLS细胞后,STF-31给药组的细胞数与空白对照组(0μmol/L)细胞相比明显减少.ATP试剂盒的检测结果表明,STF-31可明显降低RAFLS细胞内的ATP水平(P<0.05).JC-1的荧光结果显示STF-31可诱导RAFLS细胞线粒体膜电位下降,STF-31作用48 h的RAFLS细胞凋亡率均高于空白对照组(P<0.05).表明STF-31可诱导RAFLS细胞发生明显的细胞凋亡.Western blot结果显示,STF-31可以下调凋亡抑制蛋白Bcl-2及p-Akt的表达,并能够上调凋亡诱导蛋白Bax的表达. 结论 STF-31对RA细胞有明显的增殖抑制作用并诱导RA细胞凋亡,其机制可能是STF-31能够降低RAFLS细胞内ATP水平,调节细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p-Akt的表达.

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作者: 李佳会 [1] 郭斌 [1] 刘亚明 [1] 甄亚男 [1] 王颖 [1] 霍强 [1] 刘浩 [1]
期刊: 《山西医科大学学报》2019年50卷6期 745-750页 ISTICCA
分类号: R593.22
栏目名称: 基础医学
DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2019.06.010
发布时间: 2019-07-22
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