siRNA沉默mdm2基因对胃癌细胞SGC-7901增殖和Rb基因蛋白表达的影响
Effect of silencing mdm2 gene with siRNA on proliferation of SGC-7901 cells and expression of Rb gene
目的:应用RNA干扰技术(RNAi)研究针对mdm2基因的siRNA,抑制mdm2基因的表达并诱导胃癌细胞系SGC7901细胞的凋亡.方法:将mdm2 siRNA转染入SGC7901中,通过RT-PCR检测转染前后各组细胞mdm2 mRNA表达水平;Western-blot技术检测转染前后各组细胞mdm2、Rb蛋白表达水平;在转染后不同时间点收集细胞台盼蓝染色后,计数阳性细胞数,统计细胞增殖情况.结果:转染mdm2 siRNA后的SGC7901细胞中mdm2基因mRNA水平及mdm2蛋白表达水平显著下降,Rb蛋白表达水平增加;细胞的增殖受到显著抑制.结论:特异性siRNA可以下调SGC-7901细胞中mdm2 mRNA及蛋白表达水平,同时引起Rb蛋白表达上调,干涉后细胞凋亡明显增多.提示mdm2基因与Rb基因可能存在某种相互拮抗的作用.mdm2蛋白表达下调及Rb蛋白表达上调可能是凋亡发生的机制之一.mdm2基因可作为胃癌治疗的潜在靶点.
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