沉默RAI14表达抑制胃癌细胞增殖、侵袭、迁移和血管生成
Silencing RAI14 expression inhibits gastric cancer cell proliferation,invasion,migration and angiogenesis
目的:探讨短发夹RNA(shRNA)靶向沉默维甲酸诱导蛋白14(RAI14)表达对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移和血管生成的影响.方法:首先向胃癌细胞株MKN-45随机转染成功构建的靶向沉默RAI14表达的shRNA载体片段(沉默组)或无义shRNA片段(对照组),然后采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组转染后的RAI14 mRNA表达水平,采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组转染后的RAI14蛋白和磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)的表达情况,克隆形成及细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测增殖情况,Tran-swell实验和划痕实验分别检测细胞的侵袭和迁移能力,体外细胞成管实验分析RAI14对胃癌肿瘤血管生成的影响.结果:qRT-PCR和Western blotting结果显示沉默组的RAI14 mRNA和蛋白表达水平分别显著低于对照组(P<0.05).沉默组的胃癌细胞增殖、侵袭、迁移和血管生成能力显著低于对照组(P<0.05).沉默组的p-AKT蛋白相对表达量为0.44±0.01,低于对照组1.00±0.08,差异有统计学意义(P<0.05).结论:沉默RAI14表达可抑制胃癌细胞增殖、侵袭、迁移和血管生成,可能与下调p-AKT蛋白表达有关.
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