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β3-肾上腺素能受体基因过表达促进心肌细胞肥大

Overexpression of β3-adrenoreceptor aggravates cardiac hypertrophy

摘要:

目的:通过慢病毒转染使心肌细胞过表达β3-肾上腺素能受体(β3-adrenoreceptor ,β3-AR )基因,研究其对体外培养鼠原代心肌细胞肥大的影响。方法:体外培养新生 SD 大鼠心室肌细胞,细胞培养24 h后,分别以转染复数(multiplicity of infection,MOI)20、50、80、100转染只携带绿色荧光蛋白(GFP)慢病毒(空病毒),病毒转染72 h 后,在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白 GFP 表达情况,以确定最佳转染复数。心肌细胞以最佳 MOI 值转染携带β3-AR 基因慢病毒24 h 后,去甲肾上腺素( norepinephrine , NE )诱导心肌细胞48 h ,建立转染后体外心肌肥厚模型。蛋白免疫印迹法( Western Blot )检测β3-AR、原癌基因c-myc、c-fos 的蛋白表达水平。结果:用不同 MOI 的慢病毒转染心肌细胞,转染效率不同,以 MOI =50转染效率最高; NE 诱导心肌细胞48 h 后,随β3-AR 表达增加,c-myc、c-fos 蛋白水平表达增加(Control 组:0.098±0.012、0.105±0.008 vs NE组:0.174±0.012、0.164±0.015 vs β3-AR 转染组:0.268±0.010、0.325±0.014,P <0.05),心肌肥厚加重。结论:以携带β3-AR 的慢病毒转染心肌细胞可有效增加β3-AR 表达,随β3-AR表达增加,心肌肥厚加重。

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作者: 张慧 [1] 王丽 [1] 张源 [1] 马依彤 [2] 杨毅宁 [2] 马苗苗 [1]
期刊: 《实用医学杂志》2016年32卷8期 1219-1222页 ISTICPKU
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2016.08.006
发布时间: 2016-06-12
基金项目:
国家自然科学基金-地区科学基金项目(编号81260028) 石河子大学科学技术研究发展计划“自然科学与技术创新”团队创新项目
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