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二氯乙酸对膀胱癌细胞株T24克隆形成、侵袭和迁移的影响

Effect of dichloroacetate on colony-forming, invasion and migration of the T24 bladder cancer cells line and its mechanism

摘要:

目的 探讨二氯乙酸(DCA)对膀胱癌T24细胞株的克隆形成、侵袭和迁移的影响并探讨其相关机制.方法将膀胱癌T24细胞随机分成两组,实验组分别以5、10、20 mmol/L DCA处理,对照组以等量0.1%二甲基亚砜处理;用Giemsa染色检测T24细胞克隆形成,细胞划痕以及Transwell实验检测T24细胞的迁移侵袭能力;应用Real time PCR及Western blot检测T24细胞内上皮间质转化(EMT)相关标记物钙黏蛋白E(E-cadherin)、钙黏蛋白N(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、Snail及Slug蛋白表达.结果 细胞克隆实验显示,与对照组比较,实验组随DCA浓度增加,显著减少T24细胞的克隆形成(P<0.01);细胞划痕实验结果显示实验组随DCA浓度增加及处理时间延长,T24细胞的迁移能力下降(P< 0.01);Transwell实验结果示与对照组比较,实验组随DCA浓度增加T24细胞的迁移力降低(P<0.01);经过DCA作用48 h后,Real time PCR结果显示:T24细胞中E-cadherin的mRNA明显高于对照组(P<0.05),而Snail、Slug、vimentin和N-cadherin的mRNA表达水平明显低于对照组(P<0.05).Western blot结果显示:T24细胞中Ecadherin的蛋白水平明显高于对照组(P<0.05),而Snail、Slug、vimentin和N-cadherin的蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05).结论 DCA可抑制膀胱癌T24细胞的克隆形成、侵袭和迁移,其机制可能通过下调核转录因子Snail和Slug的表达,抑制T24细胞发生上皮间质转化.

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