葫芦素E通过诱导自噬抑制人膀胱癌细胞T24的增殖
Proliferation of human bladder cancercell line T24 inhibited by Cucurbitacin E through autophagy induction
目的 探讨葫芦素E (CuE) 对人膀胱癌细胞T24自噬的影响, 并初步研究所诱导的自噬对细胞增殖的影响.方法 通过MTT试验检测CuE对T24细胞增殖的影响.细胞经CuE处理后, 通过western-blot检测自噬相关蛋白LC3A/B和p62的表达.通过LC3翻转试验和GFP-RFP-LC3双荧光试验检测自噬流的发生.Western-blot检测自噬抑制剂3-MA对CuE所诱导自噬的抑制作用, MTT试验和细胞计数试验研究3-MA抑制自噬后CuE对细胞增殖的影响.结果 CuE抑制T24的增殖, 24 h的IC50约为0.75μmol/L.T24细胞经CuE处理后, LC3A/B II表达及LC3A/B II/I比值增高 (P <0.05) 、自噬经典底物蛋白p62表达减少 (P <0.05) 、LC3翻转试验阳性 (P <0.05) 以及LC3双荧光试验黄色和红色荧光颗粒的数目明显增多 (P <0.05) , 提示CuE诱导了自噬的发生.3-MA能够抑制CuE所诱导自噬的发生 (P <0.05) , 3-MA抑制自噬后, CuE对T24的增殖抑制效应减弱 (P <0.05) .结论 CuE在人膀胱癌细胞T24中诱导了自噬的发生, 且诱导的自噬对细胞的增殖起抑制作用.
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