碘普罗胺对HK-2细胞凋亡及对Klotho/Wnt/β-catenin信号通路的影响
Effect of Iopromide on the apoptosis and the signal pathway of Klotho/Wnt/β-catenin in HK-2 Cells
摘要目的 造影剂肾病的发病机制迄今尚未完全阐明,文中旨在观察碘普罗胺对人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)细胞凋亡以及Klotho/Wnt/β-catenin信号通路的影响,探讨碘普罗胺引起急性肾损伤的可能机制.方法 用不同浓度的碘普罗胺(37、74、111、148 mgI/mL)处理HK-2细胞24 h,应用CCK-8法测定细胞活力,DAPI染色法观察细胞核凋亡形态,Western blot法测定凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3蛋白以及Klotho、Wnt、磷酸化-β-catenin(p-β-catenin)及β-catenin蛋白表达水平.另外,加入不同剂量的N-乙酰半胱氨酸(NAC)(2、4、8、16、32 mmol/L)处理,检测NAC对碘普罗胺诱导的HK-2细胞Klotho/Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响.结果 与对照组相比,不同浓度的碘普罗胺处理组HK-2细胞活力明显降低(P< 0.05);而细胞凋亡率明显增高(P< 0.05);Cleaved-caspase-3、Wnt、p-β-catenin及β-catenin蛋白表达明显升高(P<0.05),而Klotho蛋白表达水平明显降低(P<0.05).除了37mgI/mL碘普罗胺组外,其余碘普罗胺处理组Bax/Bcl-2比值均较对照组增高(P<0.05).加入NAC处理后,能逆转碘普罗胺对Klotho/Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达的影响(P<0.05).结论 碘普罗胺可诱导HK-2细胞发生凋亡,其机制可能与其下调Klotho蛋白表达,激活Wnt/β-catenin信号通路有关.
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