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人β2m基因的克隆及表达

Cloning and Expression of Human β2m Gene

摘要:

目的克隆和表达HLA Ⅰ类分子轻链(β2m)基因,为人工制备HLA Ⅰ类分子提供基础.方法利用逆转录PCR技术从Jeg-3细胞株中克隆β2m基因,与质粒pET22b(+)重组,构建原核表达载体pET22b(+)-β2m,转化宿主菌E coli BL21(DE3),诱导β2m基因高效表达,并采用双抗体夹心ELISA法对表达产物进行抗原性和功能鉴定.结果酶切和测序证实β2m基因克隆和载体构建成功,目的蛋白在宿主菌中高效表达于包涵体中;通过包涵体的分离和纯化获得初步纯化的β2m,所制备的β2m能够与特异性抗体结合,并能与HLA Ⅰ类分子重链形成具有天然构象的HLA Ⅰ类分子.结论人β2m基因能够在原核宿主中高效表达,表达产物具有形成HLA Ⅰ类分子的功能.

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作者: 陈浩 [1] 翁秀芳 [1] 吴雄文 [1] 梁智辉 [1] 韩军艳 [1] 黄亚非 [1] 龚非力 [1]
分类号: R349.6
栏目名称: 论著
DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2004.01.001
发布时间: 2004-05-28
基金项目:
国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划(973计划)
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