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miR-19a通过抑制c-MET的表达逆转HCC827细胞吉非替尼耐药

miR-19a Reverses Gefitinib Resistance through Targeting c-MET in HCC827 Cells

摘要:

目的 明确miR-19a在调控HCC827细胞吉非替尼耐药中的作用及机制,探索miR-19a作为非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉非替尼耐药新靶点的理论依据.方法 收集非小细胞肺癌患者15例在吉非替尼耐药前后的外周血,通过Real-time PCR检测其中miR-19a的表达;在吉非替尼敏感的HCC827细胞中降低miR-19a表达,并加入吉非替尼,通过CCK8法检测其对细胞活力的影响;在构建成功的HCC827吉非替尼耐药细胞株(HCC827GR)中过表达miR-19a,并加入吉非替尼,通过CCK8法检测其对细胞活力的影响;在HCC827及HCC827GR细胞中分别降低或过表达miR-19a,通过Western blot检测c-MET蛋白表达水平;在HCC827细胞中同时降低miR-19a和c-MET表达,并加入不同浓度吉非替尼,通过CCK8法检测各组细胞活力.结果 在吉非替尼耐药的NSCLC患者外周血中,miR-19 a呈明显低表达状态;在HCC827细胞中降低miR-19a表达,吉非替尼对细胞活力的抑制效果明显下降(P<0.01);在HCC827GR细胞中过表达miR-19a,吉非替尼对细胞活力的抑制效果明显增强(P<0.01);在HCC827细胞中降低miR-19a表达,能明显促进c-MET蛋白的表达;相反,在HCC827GR细胞中过表达miR-19a,则明显抑制c-MET蛋白的表达;在HCC827细胞中同时降低miR-19 a和c-MET表达,并加入不同浓度的吉非替尼,低表达c-MET能够抵消miR-19 a对细胞活力的影响.结论 miR-19a在非小细胞肺癌细胞HCC827吉非替尼耐药中发挥着重要作用,其机制可能是通过抑制c-MET蛋白水平的表达.

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作者: 来森艳 [1] 曹小年 [2] 吴维 [1] 李国东 [1] 胡发涌 [1] 罗学来 [1]
分类号: R734.2
栏目名称: 论著
DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2019.02.007
发布时间: 2019-06-21
基金项目:
国家自然科学基金资助项目
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