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中性粒细胞胞外诱捕网促进类风湿关节炎血管新生的初步研究

A preliminary study on the promotion of angiogenesis by NETs in rheumatoid arthritis

摘要:

目的:研究中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)对类风湿关节炎(RA)炎症尤其是血管新生的作用。方法取RA及骨关节炎(OA)患者的滑膜组织切片行组织免疫荧光染色,观察NETs在关节滑膜中的存在情况。分离健康人外周血中性粒细胞,刺激NETs形成,并提取NETs作为刺激剂。MTT评估NETs对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)及RA滑膜成纤维细胞(RAFLS)增殖的影响,分别对HUVECs组和RAFLS组处理如下:对照(等体积培养基);NETs (0.28 mg/L NETs)。细胞划痕实验评估NETs对HUVECs迁移能力的影响,分为3组:对照组、血管内皮生长因子组(40μg/L VEGF)和NETs组(0.28 mg/L NETs)。结果(1)与OA相比,RA滑膜组织中有较多的NETs存在。(2)体外培养的中性粒细胞刺激后可形成NETs,提取的NETs-DNA浓度为27.8 mg/(L·106细胞)。(3)MTT实验结果显示,分别与各自对照组相比,低浓度NETs(0.28 mg/L)可以促进HUVECs(0.499±0.011 vs.0.393±0.009,P<0.05)及RAFLS (0.266±0.007 vs.0.192±0.007,P<0.05)增殖。(4)划痕实验显示,低浓度NETs(0.28 mg/L)可促进血管内皮细胞迁移。结论 RA滑膜组织中有较多的NETs存在,低浓度NETs可以促进血管新生。

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