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辛酸沉淀结合阴离子交换层析纯化马IgG的研究

Fractionation of equine IgG using caprylic acid precipitation in combination with anion exchange chromatography

摘要:

目的 以辛酸沉淀结合离子交换层析纯化破伤风抗毒素马免疫血浆,获得高质量的马IgG,为抗毒素F(ab’)2的制备奠定基础.方法 通过对辛酸沉淀马血浆过程中的pH、辛酸浓度以及血浆稀释倍数的实验设计(DoE),研究不同条件对IgG纯度、效价、比活性、浊度以及过滤速度的影响,确定各工艺参数的可操作区间,并结合Capto DEAE阴离子交换层析以流穿模式进一步纯化IgG.结果 马血浆经一步辛酸沉淀获得的IgG纯度(SDS-PAGE)大于92%、分子排阻色谱(SEC)纯度大于95%,比活性较血浆提高2.14±0.29倍;辛酸沉淀后的IgG样品经阴离子交换层析,可有效去除聚合体以及小分子杂质,将纯度提高至95% (SDS-PAGE)和98% (SEC).结论 马血浆经辛酸沉淀和阴离子交换层析可获得高纯度、高比活的IgG.

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