大鼠缺血下肢血管新生过程中人血管内皮细胞生长因子165和人血管形成素的协同效应
Synergistic effect of human vascular endothelial grow factor 165 and angiopoietin-1 augment revascularization in rat models of hindlimb ischemia
目的:观察肌肉转染腺病毒(adenovirus,Ad-)携带的人血管内皮细胞生长因子-165(vascular endothelial growfactor,Ad-VEGF165)和人血管形成素-1(angiopoietin-1,Ad-Ang-1)基因对大鼠缺血下肢的生血管效应.方法:用SD雄性大鼠84只,分为7个组,每组12只,分别为正常组、假手术组、结扎组、绿色荧光蛋白(greenfluorescence protein,GFP)组(作为病毒对照组)、Ang1组、VEGF165组、Ang1+vEGF165组.制作大鼠下肢血管闭塞模型,肌肉内注射Ad-VEGF165或/和Ad-Ang-1,以Western法检测生长因子蛋白表达、免疫组化检测基因导入后在缺血肌肉引起的效应.结果:①肌肉经注射Ad-VEGF 165和Ad-Ang1后高表达人VEGF165蛋白和人Ang1蛋白.②术后7 d处理组与对照组新生毛细血管数目无明显差别.但术后14 d和21 d Ang1和VEGFi65组的毛细血管/骨骼肌纤维数目比明显高于对照组(F=24.53,P<0.01),VEGF165+Ang1两因子合用组明显高于单用组(F=12.22,P<0.01).③VEGF165组及VEGF165+Ang1合用组出现大量包围着一厚层平滑肌肌动蛋白α(smooth muscle actin,α-SMA)阳性平滑肌细胞的血管,其数量与肌肉数比值明显高于对照组(F=9.73,P<0.01).④因子单用组和合用组肌肉内出现大量BrdU阳性细胞浸润,部分细胞表面呈现C-Kit阳性,新生血管内皮细胞中也有C-Kit阳性标记(F=9.73~35.10,P<0.01).结论:①Ad-VEGF165和Ad-Ang1能促进缺血肢体血管新生,两者合用的生血管效应更为显著.②VEGF165能促进包被平滑肌细胞的形似微小动脉的血管数量增多.③肌肉血管新生增加除了血管生成作用外,可能还有血管发生的参与.
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