换一批以ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体
Cloning human growth hormone gene into the mammalian expression vector with ECHO system
摘要目的:构建ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体,以克服原核生物表达系统生产人生长激素存在的缺陷.方法:实验于2002-08在解放军广州军区广州总医院医学实验科进行.①先把人生长激素基因片段克隆到ECHO系统的供载体中,构建供载体pUni/Lox-HGH.②让该供载体与具Lox位点的受载体在Cre重组酶的作用下融合,构建出人生长激素的哺乳动物表达载体pcDNA4.1/pUni-HGH,使人生长激素基因处于CMV启动子的调控下,EcoRI单酶切及BamHI/EcoRI双酶切鉴定重组质粒.结果:由琼脂糖凝胶电泳和序列测定证实,用ECHO克隆系统构建的融合质粒中,确实含有人生长激素带内含子的基因序列.结论:用ECHO克隆系统可以构建人生长激素的哺乳动物表达载体,且方便、快捷,为取代原核生物表达系统生产人生长激素,提供了依据.
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分类号
R394.8（医学遗传学）
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1673-8225.2006.20.050
发布时间
2006-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中国科学院项目（非规范项目）（39880044）
广州市科技攻关计划（99-Z-022-01）
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