实验性牙移动大鼠外周血内皮祖细胞的培养
Culture of rat peripheral blood endothelial progenitor cells during experimental tooth movement
背景:观察血管内皮祖细胞在牙周血管改建中的作用规律对于研究正畸牙周改建机制具有重要意义.目的:对牙移动大鼠外周血内皮祖细胞进行体外分离、培养及鉴定,探讨牙齿移动足否可动员骨髓内皮祖细胞进入外周血.设计、时间及地点:细胞体外分离培养及生物学指标检测,随机对照动物实验.于2007-09/2008-04在吉林省口腔生物医学工程重点实验室完成.材料:24只Wistar大鼠.随机分为实验组和对照组,每组12只.方法:实验组建立大鼠牙移动模型,对照组置牵拉装置但不加力.加力第2天取两组动物外周血制作细胞涂片,检测其中CD133阳性细胞数.同时以Percoll密度梯度分离提取其外周血单个核细胞,培养全第12天,取两组细胞爬片进行相关指标检测.主要观察指标:以免疫细胞化学染色和免疫荧光化学染色检测细胞表面标志物,荧光化学检测细胞吸收乙酰化低密度脂蛋白及荆豆凝集素1情况,MTT法检测细胞增殖情况.结果:实验组细胞涂片中CD133阳性细胞率明显高于对照组(P<0.05).所培养细胞可同时吸收Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白、FITC标记的荆豆凝集素1,呈CD133、Ⅷ因子、CD34阳性.实验组细胞增殖活性高于对照组(P<0.05).结论:实验初步证实了实验性牙移动可动员大鼠骨髓内皮祖细胞进入外周血.
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