凋亡素基因对人结肠癌细胞作用的研究
Experimental study on effect recombinant pEGP-VP3 on human colonic carcinoma cell line
目的探讨凋亡素基因的导入对人结肠癌细胞的影响.方法将凋亡素基因VP3克隆入真核表达载体pEGFP-C2,构建成重组质粒pEGFP-VP3.用脂质体转染法将pEGFP-C2和pEGFP-VP3分组分别转染人类结肠癌细胞(Lovo)和小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3),通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在不同组细胞中的定位、表达及细胞的生长、凋亡情况,MTF法测定不同组细胞的生长曲线,并用An-nexin V-FITC流式细胞技术检测细胞的凋亡率.结果在Lovo/EGFP组和3T3/EGFP-VP3组细胞中,EGFP均匀分布于细胞中,细胞形态无明显变化,细胞凋亡率较非转染细胞组亦无明显增加.而在Lovo/EGFP-VP3组细胞中,EGFP-VP3以荧光颗粒形式集中在细胞核,并逐渐变粗,最后细胞碎裂成片状,流式细胞技术检测Lovo/EGFP-VP3组的细胞凋亡率明显高于其他对照组(P<0.01).结论 pEGFP-VP3可诱导人类结肠癌细胞凋亡.
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