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超高效液相色谱-串联质谱法测定干血点中25-羟基维生素D

Detection of 25-hydroxyvitamin D in dried blood spot by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry

摘要:

目的 建立干血点中25-羟基维生素D2[25 (OH) D2]和D3[25 (OH) D3]的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)同时测定方法.方法 干血点经过定量取样,加水超声提取后加乙腈沉淀蛋白,再使用乙酸乙酯:正己烷(2∶1,Ⅴ/v)萃取,氮气吹干后加PTAD试剂衍生,氮吹干后用流动相复溶,使用Waters BEH C18柱分离、电喷雾正离子(ESI+)模式和多反应监测(MRM)检测,同位素内标法定量.结果 25(OH) D2和25(OH) D3分别在全血浓度为5~167ng/mL和1.7 ~ 167ng/mL的范围内呈良好的线性关系,相关系数r>0.999;检出限(LOD)分别为1.5ng/mL和0.25ng/mL,定量限(LOQ)分别为5ng/mL和1.7ng/mL;样品高低两水平的加标回收率均>80%,日内精密度均<9%,日间精密度均<10%.结论 该方法需血量少、灵敏、快速、准确,适用于人群维生素D营养状况的监测.

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