SARS-CoV S蛋白功能性受体ACE2在人、兔角膜、结膜中的表达
Expression of SARS coronavirus S protein functional receptor ACE2 in human and rabbit cornea and conjunctiva
目的SARS冠状病毒(SARS-CoV)的S蛋白介导了病毒与宿主细胞的结合,最近已鉴定出SARS-CoV S蛋白的功能性受体是血管紧张素转化酶2(angiotensin-convertingenzyme 2,ACE2).本研究检测了ACE2在人、兔眼结膜、角膜中的表达,由此来初步推断SARS-CoV由眼部入侵的可能.方法分别采取:(1)成人眼球破裂伤摘除的眼角膜和结膜组织;(2)4~6月中期引产胎儿的眼角膜、结膜、心、肺组织;(3)兔眼角膜、结膜、心、肺组织;(4)培养的人结膜成纤维细胞和兔角膜上皮细胞.分别采用RT-PCR和免疫组化方法检测各组织、细胞中ACE2的表达.取尸体解剖的成人心、肺组织作为对照.结果RT-PCR法在上述各种组织和细胞中均检测到ACE2的扩增条带,其中胎儿、成人和兔的角膜、结膜扩增条带较心、肺稍弱,兔各组织的扩增条带亮度与对应的人体组织的扩增条带亮度相近.ACE2免疫组化反应产物主要位于胞浆和胞膜,呈棕黄色或棕褐色.角膜和结膜的上皮细胞及角膜内皮细胞呈明显的阳性表达,角膜和结膜的成纤维细胞呈弱阳性表达,培养的人结膜成纤维细胞和兔角膜上皮细胞亦可见阳性表达.兔组织中的ACE2表达强度及组织定位与人相近.结论本研究从mRNA和蛋白质水平证实了眼组织存在SARS冠状病毒S蛋白的功能性受体ACE2,由此初步推断SARS-CoV存在由眼部入侵的可能,为临床进一步研究SARS的防护和致病机制提供了线索.同时,为新西兰大白兔可能成为研究SARS-CoV入侵途径的动物模型提供了初步的实验依据.
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