Dispase Ⅱ消化法原代培养兔结膜上皮细胞及鉴定-论文-万方医学网

Dispase Ⅱ消化法原代培养兔结膜上皮细胞及鉴定

Primary culture of rabbit conjunctival epithelial cells with Dispase Ⅱ and cell identification

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摘要：

目的研究Dispase Ⅱ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察其体外生长特性.并采用免疫组织化学染色鉴定培养的上皮细胞.方法 Dispase Ⅱ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观祭不同时期细胞的生长情况、细胞形态,做广谱角蛋白、MUC5AC免疫荧光染色及PAS染色鉴定;并比较不同部位结膜上皮细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达阳性情况.结果 DispaseⅡ消化法能够获得大量的较纯净的结膜上皮细胞,细胞生长增殖快,能传代4～5代;绝大多数细胞广谱角蛋白免疫荧光染色阳性,少数细胞MUC5AC表达阳性及PAS染色阳性.睑结膜、穹隆部结膜和球结膜细胞PCNA阳性率分别为:(32.14±1.69)%、(27.67 4±1.20)%、(22.76 4±1.73)%,兔睑结膜上皮细胞PCNA阳性率较穹隆部及球结膜上皮细胞的PCNA阳性率高,各部位PCNA阳性率间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DispaseⅡ消化法是进行体外结膜上皮细胞培养的理想方法,兔眼睑结膜处可能存在结膜干细胞.

作者：谢秀雯 ^[1] 周建强 ^[1] 崔红平 ^[2]

作者单位：常州市第三人民医院眼科,江苏省常州市,213001 ^[1] 上海同济大学附属东方医院眼科,上海市,200120 ^[2]

期刊：《眼科新进展》2011年31卷4期 312-316页 ISTICPKU

关键词：结膜上皮细胞结膜上皮干细胞 DispaseⅡ 原代培养免疫组织化学鉴定

主题词：结膜(Conjunctiva)上皮细胞(Epithelial Cells)消化(Digestion)兔(Rabbits)免疫组织化学(Immunohistochemistry)

分类号： R777.2

栏目名称： 实验研究

发布时间： 2016-12-29

基金项目：

国家自然科学基金资助

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