紫外线照射对大鼠晶状体上皮细胞Ca2+-ATP酶表达及活性影响的实验研究
Effects of ultraviolet irradiation on expression of Ca2+-ATPase and their activities in rat lens epithelial cells
目的 研究紫外线对大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC) Ca2+-ATP酶表达及活性的影响.方法 6周龄的Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,对照组大鼠未照射紫外线,实验组分别给予紫外线照射1d、3d和7d,照射完毕后摘除双眼眼球,取出晶状体.利用实时荧光定量PCR检测紫外线对LEC Ca2+-ATP酶在mRNA水平表达的影响,Western blot检测紫外线对LEC Ca2+-ATP酶在蛋白水平表达的影响,化学比色法检测LEC内超微量Ca2+-ATP酶活性的变化,HE染色观察LEC的形态学改变,免疫组织化学SP法检测LEC中Ca2-ATP酶的表达情况.结果 紫外线照射1d、3d、7d后,大鼠LEC中Ca2+-ATP酶mRNA、蛋白和活性表达水平逐渐下降,其中ATP2A2和ATP2C2的mRNA表达水平分别是对照组的(0.60±0.10)倍、(0.20±0.05)倍、(0.05±0.01)倍和(0.40±0.10)倍、(0.10±0.05)倍、(0.02±0.01)倍;Ca2+-ATP酶蛋白相对灰度值分别是对照组的(0.66±0.01)倍、(0.46±0.02)倍和(0.15±0.01)倍;Ca2 +-ATP酶活性表达水平分别是对照组的0.87倍、0.61倍及0.22倍.以上各实验组与对照组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05).实验组LEC细胞形态学亦发生明显变化,免疫组织化学检测大鼠LEC Ca2+-ATP酶表达逐渐下降,平均光密度值与对照组比较差异均有统计学意义(均为P <0.05).结论 紫外线照射可降低大鼠LEC Ca2+-ATP酶的表达,且呈时间和剂量依赖性,提示Ca2+-ATP酶对紫外线诱导的LEC凋亡、维持晶状体透明以及在白内障的发生发展中具有重要意义.
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