没药甾酮对H2O2损伤PC12细胞的保护作用
Protection against hydrogen peroxide-induced cytotoxicity in PC12 cells by guggulsterone
探讨没药甾酮(guggulsterone)对氧化应激损伤 PC12 细胞的保护作用.以过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)损伤 PC12 细胞为氧化应激损伤模型, 维生素E为对照, 采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide,MTT]法检测细胞增殖状况; 试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)及一氧化氮(nitric oxide,NO)的释放; DCFH 法和Fura 2-AM法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)和 Ca2+的含量; 碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡;罗丹明123(rhodamine 123,Rh 123)染色FCM检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane protential,MMP).结果表明,没药甾酮(0.1~10 μmol·L-1)可使200 μmol·L-1 H2O2作用24 h后的PC12细胞生长抑制率下降; 细胞外LDH和NO, 细胞内ROS和Ca2+含量降低; 明显抑制200 μmol·L-1 H2O2作用12 h后诱导的PC12细胞凋亡和线粒体膜电位降低作用,没药甾酮(0.1~10 μmol·L-1)使细胞凋亡率由24.3%下降至18.4%、15.9%、11.8%.实验结果表明,没药甾酮对氧化应激损伤 PC12 细胞具有保护作用,其机制可能为降低细胞内ROS含量, 进而抑制 LDH 和 NO 释放,降低细胞内Ca2+含量,升高线粒体膜电位,减少细胞凋亡.
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