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Jmjd3和Ezh2酶活性抑制剂对人间充质干细胞成脂分化的影响及机制研究

Effects of Jmjd3 and Ezh2 Enzyme Activity Inhibitors on Adipogenic Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells and Its Mechanism

摘要:

目的 研究EZH2和JMJD3对人脂肪间充质干细胞成脂分化的影响及可能机制.方法 体外培养人脂肪来源间充质干细胞并进行诱导分化.分化过程中分别加入EZH2酶活性抑制剂GSK126(6μM)和JMJD3酶活性抑制剂GSKJ4(20μM),对照组加入DMSO.采用Realtime PCR方法检测脂肪细胞分化基因PPARγ、FABP4和ADIPOQ;棕色化标志基因UCP1、PRDM16和CIDEA,以及米色脂肪独有的标志基因CD137、TMEM26和TBX1,并计算各组与对照组的相对表达量.采用Western Blot法检测H3K27me3、UCP1、JAK2、STAT3和pSTST3的蛋白表达量.结果 GSK126组的脂滴形成略减少,GSKJ4组的脂滴形成明显减少.GSK126组的H3K27me3含量减少,GSKJ4组的H3K27me3含量增加;GSK126组的UCP1、PRDM16、TMEM26和JAK2基因表达均明显增加(P<0.05);GSKJ4组的PPARγ、UCP1和JAK2的基因表达量均明显降低(P<0.05);GSK126组的UCP1蛋白表达增加而GSKJ4组UCP1蛋白表达减少.GSK126组的JAK2和pSTST3均增加,GSKJ4组的JAK2和pSTST3蛋白表达均减少.结论 EZH2酶活性抑制剂GSK126促进人MSC向棕色或米色脂肪细胞分化.JMJD3酶活性抑制剂GSKJ4抑制人MSC向棕色或米色脂肪细胞分化;EZH2和JMJD3的酶活性影响H3K27的三甲基化修饰,可能通过JAK2-STAT信号通路,发挥调控人脂肪细胞分化的作用.

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