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N-乙酰半胱氨酸在缓解氧化应激造成的血管平滑肌细胞损伤和表型转变中的作用

N-acetyl Cysteine′s Role in Attenuating Injury and Phenotype Change of Vascular Smooth Muscle ;Cells Induced by Oxidative Stress

摘要:

目的:研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)在缓解氧化应激诱导血管平滑肌细胞(VSMC)损伤和表型转变中的作用。方法小鼠VSMC( MOVA细胞)常规培养后随机分为4组:对照组、35μmol/L叔丁基氢过氧化物( t-BHP)处理组、35μmol/L t-BHP+1 mmol/L NAC处理组、1 mmol/L NAC处理组。二氯荧光黄二乙酸酯探针检测t-BHP处理后的细胞内活性氧类( ROS)水平。 CCK-8试剂盒法检测各组细胞的抑制率,实时荧光定量聚合酶链反应技术与Western blot检测血管平滑肌合成型标志物α-肌动蛋白(SMA)和合成型标志物平滑肌胚胎型肌球蛋白重链(SMemb)的mRNA和蛋白表达,同时分析NAC和t-BHP 处理对miR-145表达的影响。结果35μmol/L t-BHP处理后,细胞内ROS水平显著增高,与对照组相比,差异有统计学意义( P<0.05)。与35μmol/L t-BHP处理组相比,35μmol/L t-BHP+1 mmol/L NAC处理组细胞内的ROS水平降低( P<0.05)。与对照组相比,35μmol/L t-BHP处理后细胞抑制率、凋亡率增高,差异有统计学意义( P <0.05)。与35μmol/L t-BHP 处理组相比,35μmol/L t-BHP +1 mmol/L NAC 处理组细胞抑制率和凋亡率均降低( P <0.05)。与对照组相比,35μmol/L t-BHP处理后细胞SMA表达降低,SMemb表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。与35μmol/L t-BHP处理组相比,35μmol/L t-BHP+1 mmol/L NAC处理组SMA表达较高,SMemb表达较低(P<0.05)。与对照组相比,35μmol/L t-BHP处理后miR-145的表达降低,差异有统计学意义( P<0.05)。与35μmol/L t-BHP处理组相比,35μmol/L t-BHP+1 mmol/L NAC处理组miR-145的表达增加(P<0.05)。结论 NAC可以缓解氧化应激诱导的VSMC损伤和表型转变,此过程中伴随miR-145的表达增高。

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