摘要篇首: 软骨常规免疫荧光需经过脱钙、脱水、浸蜡、包埋等一系列步骤后才进行切片,不仅步骤烦琐而且脱钙及浸蜡过程加重了抗原的破坏[1,2];而直接冷冻切片要求材料在离体0.5h内完成,这对于手术取材和无液氮条件保存标本造成不便.为此,我们先固定标本,然后冷冻切片,水浴修复后行免疫荧光,激光共聚焦显微镜下观察软骨细胞内蛋白,定位准确.
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