换一批
换一批siRNA介导的HPV16 E6/E7基因沉默对宫颈癌SiHa增殖及凋亡的影响
Effects of siRNA-mediated HPV16 E6/E7 transcriptional gene stable silencing on proliferation and apoptosis of human cervical cancer SiHa cells
摘要目的 探讨小干扰RNA(siRNA)介导的人乳头状瘤病毒16型(HPV16) E6/E7基因沉默对宫颈癌SiHa细胞增殖及凋亡的影响.方法 设计靶向HPV16 E6/E7基因启动子区的siRNA序列,构建质粒转染SiHa细胞,筛选稳定沉默E6/E7基因的细胞系.用QT-PCR和RT-PCR检测细胞E6/E7基因mRNA的变化、Western blot检测细胞E6/E7蛋白变化;利用MTT、RT-PCR、免疫组化法检测细胞增殖情况,Tunel检测细胞的凋亡情况.结果 成功构建E6/E7基因稳定沉默的细胞株,其mRNA与蛋白沉降效率明显.MTT及Ki-67表达显示细胞增殖活性降低;Tunel显示沉默细胞凋亡增加.结论 siRNA技术可以成功诱导HPV16型E6/E7基因沉默,从而影响癌细胞的生长、增殖和凋亡.
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关键词
siRNAHPV细胞增殖与凋亡SiHa细胞iRNAHuman papillomavirus (HPV)Cellular proliferation and apoptosisSiHa cells
分类号
R73.35
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-8096.2015.12.014
发布时间
2016-01-22
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