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siRNA抑制骨肉瘤U2OS细胞系中SIRT6的表达及其生物学作用研究

Influence of down-regulation of SIRT6 expression by small interfering RNA on U2OS osteosarcoma cell line

摘要:

背景与目的:sirtuin6(SIRT6)蛋白是对人体细胞生长、代谢调控及应激反应等具有重要作用的一种核蛋白,常在细胞核中发挥多种调控作用.但该蛋白在骨肉瘤中的作用还不清楚,本研究通过下调人骨肉瘤U2OS细胞系中SIRT6的表达,观察其对U2OS细胞的作用.方法:设计合成SIRT6的siRNA序列,通过LipofectamineTM2000转染U2OS细胞系,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测SIRT6蛋白的表达情况,利用流式细胞术检测细胞凋亡,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力,CCK-8法分析对紫杉醇的敏感性.结果:成功构建SIRT6 siRNA序列,Western blot检测转染后24、48和72 h的蛋白水平,实验组较对照组明显降低.流式细胞术检测细胞凋亡也显示实验组凋亡增加(P<0.05).Transwell法检测结果显示,实验组侵袭与迁移能力较对照组下降(P<0.05).CCK-8法检测细胞生长情况,可见经紫杉醇处理后实验组生长较对照组下降明显,差异有统计学意义(P<0.05).结论:下调骨肉瘤U2OS细胞中SIRT6的表达可以抑制骨肉瘤细胞侵袭,促进凋亡,并增强骨肉瘤细胞对紫杉醇的化疗敏感性.

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