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miR-203a-3p通过靶向调控GATA6抑制食管鳞癌细胞的增殖和侵袭

miR-203a-3p inhibits cell proliferation and invasion of esophageal squamous cell carcinoma by targeting GATA6

摘要:

背景与目的:生物信息学分析提示GATA6是miR-203a-3p的潜在靶基因,明确miR-203a-3p通过靶向调控GATA6抑制食管鳞癌细胞的增殖和侵袭.方法:采用LipofectamineTMRNAiMAX对培养的KYSE-70和KYSE-180细胞瞬时转染.采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测miR-203a-3p和GATA6的表达水平.采用蛋白质印迹法(Western blot)检测GATA6蛋白的水平.质粒联合转染后检测相对萤光素酶活性.对食管鳞癌患者标本进行恶性肿瘤与异型增生组织miR-203a-3p和GATA6的表达检测.结果:RTFQ-PCR及Western blot检测结果显示,与对照组比较,GATA6基因和蛋白的表达在miR-203a-3p转染组中降低,在miR-203a-3p inhibitor组却升高,差异均有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,miR-203a-3p转染组KYSE-70细胞增殖能力下降,miR-203a-3p inhibitor组中却升高,差异均有统计学意义(P<0.05).在KYSE-180中虽然差异无统计学意义,但其趋势却与KYSE-70一致.与对照组比较,在KYSE-70和KYSE-180细胞系中,侵袭细胞数值/视野在miR-203a-3p转染组中均明显下降(P<0.01),在miR-203a-3p inhibitor组中却明显升高(P<0.05).与miR-203a-3p掠夺型+GATA6野生型组和miR-203a-3p野生型+GATA6突变型组比较,相对萤光素酶活性在miR-203a-3p野生型+GATA6野生型组中降低,差异有统计学意义(P<0.05).与异型增生组织相比较,100%(10/10)食管鳞癌患者miR-203a-3p在恶性肿瘤组织的表达下调,而GATA6表达水平上调.结论:miR-203a-3p通过靶向调控GATA6抑制食管鳞癌细胞的增殖和侵袭能力.

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作者: 殷彩桥 [1] 方呈祥 [2] 陈婷 [1] 黄慧 [1] 郑轶 [1] 谭家武 [1] 张继乔 [1] 张辉 [1]
作者单位: 湖北民族大学附属民大医院消化内科,湖北 恩施,445000 [1] 湖北民族大学附属民大医院肿瘤科,湖北 恩施,445000 [2]
期刊: 《中国癌症杂志》2020年30卷6期 441-448页 ISTICPKUCSCDCA
分类号: R735.1
栏目名称: 论著
DOI: 10.19401/j.cnki.1007-3639.2020.06.006
发布时间: 2020-07-30
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