Lipofectamine TM2000介导pIRES2-EGFP-NT3转染新生小鼠离体耳蜗基底膜的实验研究
pIRES2-EGFP-NT3 transfected cultivation of basal membrane of Corti's organ from neonatal mouse in vitro with Lipofectamine 2000
目的 构建真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3,检测其在阳离子脂质体介导下对新生小鼠离体耳蜗基底膜的转染情况.方法 构建含有目的 基因NT3的真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3后,在阳离子脂质体Lipofectamine TM2000介导下将其转染新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织,转染后24 h,通过Confocal显微镜观察小鼠离体耳蜗基底膜的转染情况和转染效率.结果 成功构建了真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3,通过阳离子脂质体Lipofectamine TM2000介导,该质粒在新生小鼠离体耳蜗基底膜转染的范围内转染进17个细胞,说明该质粒在阳离子脂质体介导下能转染新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织.结论 含有目的 基因NT3的真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3的成功构建,及其在阳离子脂质体介导下对新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织的有效转染,为研究NT3基因转染对正常及致聋小鼠耳蜗效应的实验奠定了基础.
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