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RNA干扰GRP75表达改善人肺腺癌细胞对顺铂耐药性

RNA Interference Targeting GRP75 Decreases Cisplatin Resistance in Human Lung Adenocarcinoma Cell

摘要:

背景与目的 GRP75(glucose regulated protein 75)属于热休克蛋白(hot shock protein,HSP)家族,是一种主要位于线粒体的分子伴侣,在某些耐药的肿瘤细胞中高表达.本研究通过慢病毒介导的RNA干扰技术沉默GRP75基因的表达,观察下调GRP75的表达对肿瘤细胞耐药性的影响并探讨GRP75在肿瘤细胞耐药机制中的作用.方法 以顺铂为诱导药物,人肺腺癌细胞系A549为诱导对象,采用逐步增加剂量与大剂量冲击相结合的方法,诱导建立耐顺铂细胞株A549/CDDP.分别将包裹GRP75-shRNA和不含干扰序列的慢病毒转染A549和A549/CDDP细胞,在荧光显微镜下观察各组细胞转染率,应用MTT比色法检测干扰前后各组细胞对顺铂的敏感性,应用Western blot检侧干扰前后各组细胞GRP75,p53,bd-2的表达.结果 各组细胞感染效率均在90%以上,转染后A549/CDDP和A549细胞中GRP75的表达均明显下调(P<0.05).转染前后A549/CDDP细胞对顺铂的耐药指数分别为21.52和4.14.转染后A549/CDDP细胞内p53的表达上调(P<0.05),bcl-2表达下调(P<0.05).结论 GRP75是A549细胞对顺铂耐药机制的相关蛋白之一,其在耐药机制中的作用与其对p53和bcl-2的调控有关.

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作者: 石思恩 [1] 何泽锋 [2] 蔡建春 [1] 邱江锋 [1]
期刊: 《中国肺癌杂志》2011年14卷4期 305-310页 MEDLINEISTICPKUCSCD
分类号: R734.2
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2011.04.01
发布时间: 2011-07-08
基金项目:
国家自然科学基金
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