换一批
换一批CD133阳性/阴性肺癌细胞的分选、鉴定及差异基因的筛选
Isolation and Identification of CD133 Positive and Negative Cells from Human Lung Cancer and Screening of the Differential Genes between the Positive and Negative Cells
摘要：
背景与目的研究表明多种实体肿瘤中存在肿瘤干细胞（cancer stem cells, CSCs），肿瘤干细胞与非肿瘤干细胞的生物学特性存在已有的明显差异，而CD133被认为是肿瘤干细胞的标记物，因此CD133阳性细胞与CD133阴性细胞可能存在明显差异。本研究通过分选人肺腺癌A549细胞中的CD133阳性及CD133阴性细胞，鉴定两组细胞的生物学特性并在人组织标本进行验证，利用基因芯片筛选转移相关差异基因。方法采用磁式分选（mag-netic activated cell sorting, MACS）的方法对人肺腺癌A549中CD133阳性细胞、CD133阴性细胞进行分选，通过无血清条件培养、平板克隆、血清诱导分化及基因芯片等实验，比较两组细胞“sphere”形成、细胞增殖、细胞分化以及差异基因，并在人组织标本进行CD133表达与临床特性的验证分析。结果 CD133阳性细胞能在无血清培养基中悬浮生长并形成“sphere”；其平均克隆形成率（57.1%）明显高于CD133阴性细胞（3.3%）；CD133阳性细胞能被血清诱导分化、表达腺癌标志物CK7；两组细胞中的19个转移基因表达水平相差两倍或以上，差异最高达12倍；肺癌组织中CD133阳性细胞主要分布于癌巢周边，数量稀少，其表达与肿瘤组织学分型、分级及临床分期无关。结论 CD133阳性肺腺癌A549细胞具有CSCs特性；两组细胞在转移相关基因的表达存在明显差异，其中CD82可能在CD133阳性细胞的转移机制中起重要作用。
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作者：
作者单位：
梅州市人民医院病理科, 梅州,514031
[1]
广州医科大学病理教研室, 广州,510182
[2]
关键词：
CD133肺腺癌磁式分选基因芯片转移相关基因CD133Adenocarcinoma of lungMagnetic activated cell sorting (MACS)DNA microarrayMetasta-sis-related genes
栏目名称：
基础研究
DOI：
10.3779/j.issn.1009-3419.2015.03.01
发布时间：
2015-04-09
基金项目：
教育部博士点基金博导类课题
广东省自然科学基金
广州市科技计划项目
广州市教育系统创新学术团队项目(No.13C06)资助is study was supported by Ph.D. Programs Foundation of Ministry of Education of China
National Nature Science Foundation of Guangdong Province
Science and technology project of Guangzhou city
Education system Innovative Academic Team of Guangzhou city (No.13C06)
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