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筛选高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株

Screening of Highly Expressed CPEΔN Lung Cancer H1299 Cells

摘要:

背景与目的 N端截短的羧肽酶E(N-terminal truncated carboxypeptidase E, CPEΔN)是一个新的肿瘤转移相关蛋白。本研究旨在筛选高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株,为完成小鼠活体成像实验创造条件。方法构建CPEΔN的慢病毒表达载体。分别用CPEΔN慢病毒表达载体或对照慢病毒空载体转染H1299细胞,2μg/mL的嘌呤霉素加压筛选。Western blot分析CPEΔN蛋白的表达,荧光素酶报告基因实验分析荧光素酶对底物的分解作用。结果当感染倍数(multiple of infection, MOI)是20时,慢病毒对H1299细胞的转染效率可以达到80%。CPEΔN高表达H1299细胞株(H1299-CPEΔN)和对照慢病毒载体表达H1299细胞株(H1299-control)中CPEΔN蛋白的表达量为4:1。H1299-CPEΔN和H1299-control均能够有效分解荧光素酶底物,可以满足活体成像实验的需求。结论筛选出高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株,为活体成像实验的开展创造了条件,也为进一步解释CPEΔN促进肿瘤转移的分子机制奠定了基础。

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作者: 孙静 [1] 张桂荣 [1] 王虹月 [1] 申慧 [1]
期刊: 《中国肺癌杂志》2015年6期 340-344页 MEDLINEISTICPKUCSCD
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2015.06.03
发布时间: 2015-08-05
基金项目:
国家自然科学基金面上项目 辽宁省科技攻关项目 沈阳市科技攻关项目(No.F12-193-9-15)资助hTe study was supported by the grants from National Natural Science Foundation of China Liaoning Province Science and Technology Key Project Shenyang City Science And Technology Key Project (No. F12-193-9-15)
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