换一批
换一批靶向抑制基因DENN-SV诱导人乳腺癌细胞系MCF-7凋亡与NF-κB的关系
Relationship between NF-kappa B and human breast cancer cell line MCF-7 apoptosis induced by targeting inhibiting DENN-SV gene
摘要目的:研究DENN-SV基因在人乳腺癌细胞系MCF-7中抗凋亡作用的可能机制.方法:将前期试验筛选出的含最佳靶点序列的菌株扩增并抽提质粒,将实验分为空白组、空白载体转染组及最佳靶点组.将实验分为两组,每组分为空白组、空白载体转染组及最佳靶点组,一组转染后48h给予TRAIL 25 ng/ml处理4h,另一组不予TRAIL处理.收集细胞,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,采用Elisa法测定细胞裂解液中NF-κB含量,采用EMSA法检测核蛋白样品中NF-κB活性.结果:流式细胞仪检测TRAIL诱导凋亡效果增强,与空白组、阴性对照组相比较差异具有统计学意义(P＜0.05)；Elisa检测NF-κB结果示实验组的NF-κB表达量显著降低差异有统计学意义(P＜0.05),EMSA检测NF-κB结果示实验组的NF-κB活性减弱差异有统计学意义(P＜0.05).结论:干扰DENN-SV基因的表达后,给予TRAIL处理可引起MCF-7细胞的凋亡率增高.这种现象的机制可能与NF-κB活性有关,且该现象与NF-κB的关系与TRAIL的作用没有直接联系.
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关键词
DENN-SV短发夹RNARNA干扰人MCF-7细胞系NF-κBDENN-SVShort hairpin RNARNA interferenceHuman MCF-7 cell lineNF-κB
分类号
R737.9
栏目名称
DOI
10.7620/zgfybj.j.issn.1001-4411.2014.06.52
发布时间
2014-03-19
基金项目
辽宁省科技厅社会发展攻关计划资助课题（2010225034）
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