换一批
换一批扩增阻碍突变系统聚合酶链反应同时检测MTHFR和MTRR基因多态性
Amplification refractory mutation system PCR detection of MTHFR and MTRR polymorphisms
摘要目的:探讨通过扩增阻碍突变系统聚合酶链反应(ARMS-PCR)方法,在单个PCR反应体系内同时检测MTHFR 677 C＞T、1298 A＞C和MTRR66A＞G基因多态性.方法:选取2012年7月～2013年3月在郑州大学第三附属医院(河南省妇幼保健院)进行孕前或孕期检查的育龄女性135名,留取空腹静脉血通过ARMS-PCR检测MTHFR 677 C＞T、1298A＞C和MTRR66 A＞G基因多态性,同时随机留取30名研究对象口腔黏膜细胞,利用Taqman-MGB技术,通过荧光定量PCR方法验证ARMS-PCR结果.结果:ARMS-PCR产物电泳后条带清晰,易于判读3个位点SNP基因型;荧光定量PCR结果显示,30份样本中,两种方法的基因分型结果完全一致.郑州地区汉族育龄女性中,677T等位基因频率为66.3％,TT纯合子占42.9％;1298C等位基因频率为11.1％,纯合子CC占0.8％;66G等位基因频率为23.3％,纯合子GG占3.0％.结论:ARMS-PCR同时检测MTHFR 677 C＞T、1298 A＞C和MTRR 66A＞G基因多态性具有高效、经济、快速的特点,值得在SNP分型中使用.
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