换一批
换一批沉默LSD1基因对卵巢癌SKOV3细胞系紫杉醇耐药性及生物学行为的影响
Effect of silent LSD1 gene on taxol resistance and biological behavior of ovarian cancer cell line SKOV3
摘要目的 探讨LSD1基因对卵巢癌SKOV3细胞系紫杉醇耐药性、增殖和细胞周期的影响.方法 采用大剂量间断冲击方法建立人卵巢癌耐药细胞系SKOV3 res TAX.针对LSD1基因mRNA靶向设计小分子干扰RNA (siRNA)沉默片段,构建慢病毒颗粒载体,并转染卵巢癌耐药细胞系SKOV3resTAX.流式细胞术检测慢病毒转染效率;实时定量聚合链式反应检测转染后LSD1的转录水平;CCK-8试剂盒检测转染后耐药细胞系的增殖能力及紫杉醇耐受能力;流式细胞术检测转染后细胞周期的时相变化;蛋白质免疫印迹法检测LSD1基因、抑癌基因p53和p21、细胞周期依赖性蛋白CDK2、周期蛋白cyclin E及核增殖抗原PCNA的表达.结果 通过测定卵巢癌细胞系紫杉醇半抑制浓度,证明耐药性细胞系建立成功.流式细胞术结果显示,慢病毒颗粒载体转染效率均非常高,LSD1沉默慢病毒载体si-LSD1-1能显著降低LSD1的转录水平.转染后耐药细胞系的增殖能力及紫杉醇耐受能力都显著下降,细胞周期被阻滞在G0/G1期.蛋白质印迹结果显示,同si-control组相比,LSD1蛋白表达量下降,同时p53和p21表达上调,CDK2、cyclin E和PCNA表达被显著下调.结论 LSD1基因与卵巢癌SKOV3耐药细胞系的增殖、细胞周期以及紫杉醇耐受能力具有密切关系,可作为紫杉醇等化疗药物联合基因治疗的候选靶点.
更多相关知识
- 浏览126
- 被引4
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
