摘要目的 探讨大鼠脂肪源性干细胞(ADSCs)体外培养及诱导分化成为平滑肌细胞的可行性.方法 取SD大鼠双侧腹股沟脂肪组织,酶消化法分离,体外扩增ADSCs,流式细胞仪检测ADSCs表面标志物表达及细胞周期.取第3代生长期的细胞,分别用一定浓度的维生素C、地塞米松、肝素诱导分化并培养2周,倒置相差显微镜观察细胞生长情况和形态变化,在诱导28 d左右取对照组及诱导组细胞,采用免疫荧光法及Western Blot半定量检测平滑肌α-肌动蛋白(SMA-α)表达,采用荧光半定量PCR法检测SMA-α mRNA水平.结果 培养的ADSCs呈多层生长,形态多为梭形.流式细胞仪检测细胞表面标志物CD105、CD29、CD44呈阳性表达,HLA-DR、vWF、CD34呈阴性表达;细胞周期结果显示细胞为二倍体.处于生长对数期的细胞加入诱导剂诱导后细胞多为短梭形,有胞浆突起,细胞核明显,有部分细胞出现多核,相邻细胞相互融合,有向相同方向生长的趋势.免疫荧光结果显示SMA-α呈阳性表达,Western Blot结果显示SMA-α在诱导组相对含量高.荧光半定量PCR结果显示诱导组的SMA-α高表达.结论 由脂肪组织分离培养的ADSCs具有干细胞特性.ADSCs在体外一定条件下可诱导分化成平滑肌细胞.
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