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麻疹病毒Edmonston疫苗株血凝素基因克隆及表达

Cloning of hemagglutinin gene of Edmonston vaccine strain of measles virus and fusion protein expression in Escherichia coli

摘要:

目的构建麻疹病毒(MV)血凝素蛋白(H蛋白)基因的重组质粒,使其在大肠埃希菌中大量表达H蛋白,为进一步研究奠定基础.方法从MV Edrnonston株减毒活疫苗中提取基因组RNA,RT-PCR扩增H蛋白基因.用限制性内切酶Bam-HI和Hind-Ⅲ双酶切H基因片段和pGEMEX-1载体,连接后获得重组质粒MV-HpGEMEX-1.然后,用IPTG诱导重组质粒在大肠埃希菌JM109(DE3)和BL21(DE3)中表达.结果RT-PCR获得的片段长度约为1 900 bp,与MV-H基因相符.MV-H-pGEMEX-1测序结果显示:MV-H基因对码正确,核苷酸序列符合率达99.4%.转化重组质粒的大肠埃希菌,其表达产物经SDS-PAGE蛋白凝胶电泳,出现与目的蛋白分子量相一致的条带.结论成功构建MV-H蛋白表达载体MV-H-pGEMEX-1,并在大肠埃希菌中获得表达.

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作者: 杨月峰 [1] 骆东辉 [1] 贾红宇 [1] 周林福 [1]
第一作者: 杨月峰
期刊: 《中国感染控制杂志》2005年4卷2期 101-104页 ISTICPKU
分类号: R511.1
栏目名称: 论著
DOI: 10.3969/j.issn.1671-9638.2005.02.002
发布时间: 2005-05-19
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