乙型肝炎患者外周血单个核细胞中HBV DNA和HBVcccDNA定量检测
Quantitative detection of HBV DNA and HBVcccDNA in peripheral blood mononuclear cells in chronic hepatitis B patients
目的 通过对外周血单个核细胞(PBMCs)中乙型肝炎病毒(HBV)DNA和HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)的检测,证实不同临床类型乙型肝炎患者PBMCs被HBV感染的事实.方法 提取PGM-HBV质粒,用双蒸水连续10倍梯度稀释,建立浓度为3×102~3×105拷贝/mLPGM-HBV标准系列;常规分离全血中的PBMCs,提取DNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测PBMCs中HBV DNA和HBVcccDNA.结果 78例慢性乙型肝炎患者,PBMCs中HBVcccDNA阳性31例(39.74%).HBVcccDNA与血清和PBMCs中HBV DNA阳性率和滴度有良好的一致性.但在不同临床类型的乙型肝炎患者之间,PBMCs中HBVcccDNA的检出率无差别(P>0.05).结论 根据HBVcccDNA检测结果阳性,进一步证实HBV能感染PBMCs,并在其中复制;PBMCs中HBVcccDNA阳性与疾病的炎症活动和疾病的严重性无关.
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