换一批
换一批人股骨头骨微血管内皮细胞的分离培养方法
A method for isolated culture of bone microvascular endothelial cells of human femoral head
摘要目的:探讨培养人股骨头骨微血管内皮细胞分离培养方法.方法:2013年10月至2014年1月15例行髋关节置换患者切除的内部无病变的股骨头,男2例,女13例;年龄38～92岁,平均71.2岁.无菌条件下将股骨头内松质骨咬成碎骨粒,放入培养基.采用酶消化法,密度梯度离心法分离细胞;差速贴壁法,选择性培养基法纯化细胞.倒置显微镜观察细胞特点,并采用vWF、CD31免疫荧光进行细胞鉴定.结果:原代培养24 h后倒置显微镜下观察细胞数量与患者年龄呈正相关,年龄越大细胞越少.培养4～5 d细胞呈短梭形、多角形或“鹩卵石”状.培养7～10d细胞生长密集,细胞融合呈漩涡状,接触抑制明显.vWF、CD31免疫荧光检测阳性率100％,表明细胞为骨微血管内皮细胞.结论:人股骨头骨微血管内皮细胞分离培养方法简单、稳定、有效、可重复性好,可以获得纯度较高的股骨头骨微血管内皮细胞.
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关键词
股骨头微血管内皮细胞细胞培养技术细胞分离Femur headMicrovesselsEndothelial cellsCell culture techniquesCell separation
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1003-0034.2014.10.011
发布时间
2014-12-19
基金项目
国家自然科学基金资助项目（81273972）；
National Natural Science Foundation of China（81273972）
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