CXC类趋化因子受体4基因RNA干扰对人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721增殖和侵袭的影响
Effects of CXC chemokines receptor 4 gene RNA interference on the proliferation and invasion of human hepatoma cells HepG2 and SMMC-7721
目的 利用RNA干扰(RNA interference,siRNA)技术抑制人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721中CXC类趋化因子受体4(CXC chemokines receptor 4,CXCR4)基因的表达,探讨其在肝癌细胞体外增殖和侵袭过程中的作用及部分机制.方法 设计合成CXCR4特异性siRNA,转染人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721,siRNA组与对照组采用脂质体转染法转染CXCR4-siRNA与siRNA-对照,空白组以等剂量生理盐水代替.采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)验证siRNA效果,采用MTT法、流式细胞仪及Transwell小室检测细胞增殖、细胞周期和细胞侵袭情况,采用蛋白质免疫印迹法检测细胞中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表达.结果 siRNA组HepG2细胞和SMMC-7721细胞的增殖率分别为0.45±0.12和0.42±0.03,对照组为1.02±0.44和1.07±0.51,空白组分别为1.08±0.44和1.11±0.08,siRNA组细胞增殖率均显著低于对照组和空白组(P均<0.05).siRNA组HepG2细胞和SMMC-7721细胞的S期与G2/M期比例显著高于对照组和空白组,G0/G1期比例显著低于对照组和空白组,差异有统计学意义(P均<0.05).siRNA组HepG2细胞和SMMC-7721细胞的侵袭数分别为(4.55±1.49)个和(2.48±0.48)个,显著低于对照组[(42.48±3.18)个和(42.00±2.78)个]和空白组[(38.27±2.47)个和(38.19±3.11)个],差异有统计学意义(P均<0.05).siRNA组HepG2细胞MMP-9与VEGF蛋白表达量分别为2.09±0.13和0.78±0.12,SMMC-7721细胞MMP-9与VEGF蛋白表达量分别为2.11±0.14和0.81±0.13,均显著低于对照组和空白组(P均<0.05).结论 RNA干扰CXCR4基因的表达可抑制人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721的增殖和侵袭,其可能是通过调控MMP-9及VEGF蛋白的表达来调节肝癌细胞的增殖和侵袭.
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