雷帕霉素纳米粒对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用
Inhibitory effect of rapamycin-loaded nanoparticles on proliferation of vascular smooth muscle cells
目的:观察雷帕霉素( RAPA)聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米微粒(RAPA-PLGA-NPs)对血管平滑肌细胞( VSMCs)增殖的抑制作用.方法:原代培养大鼠VSMCs,并采用α-肌动蛋白免疫组化染色进行鉴定;透射电镜观察VSMCs对RAPA-PLGA-NPs的摄取;分别用MTT法和Western blot法检测RAPA-PLGA-NPs对VSMCs增殖的抑制作用以及RAPA靶蛋白(mTOR)下游蛋白表达的影响,并同时以游离RAPA作为对照.结果:成功培养VSMCs并鉴定;透射电镜显示RAPA-PLGA-NPs可被VSMCs大量摄取于细胞质中;MTT结果显示,RAPA-PLGA-NPs(1,10,100 ng/mL)能浓度依赖性地抑制VSMCs增殖(均P<0.05),且1 ng/mL的RAPA-PLGA-NPs与10 ng/mL游离RAPA的抑制作用相似(p>0.05);Western blot结果显示,2个浓度(1,10 ng/mL)的RAPA-PLGA-NPs均能降低VSMCs中S6K1和4E-BP1磷酸化水平,且作用均较游离RAPA( 10 ng/mL)明显.结论:RAPA-PLGA-NPs穿透力强,能迅速被细胞摄取,生物学效应明显强于其游离药物.
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