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基质硬度对PKN3表达及肝细胞癌侵袭转移的影响

Influence of matrix stiffness on PKN3 expression and invasion/metastasis in hepatocellular carcinoma

摘要:

目的:探讨蛋白激酶C相关激酶N3(PKN3)表达与肝细胞癌(HCC)细胞侵袭转移的关系及机制.方法:检测72例出血坏死表型HCC (HN-HCC)与32例无出血坏死表型HCC(NHN-HCC)组织标本中胶原纤维含量与PKN3的表达;将肝癌HCCLM3细胞在不同硬度的聚丙烯酰胺水凝胶培养后,检测HCCLM3细胞的运动侵袭能力、PKN3基因与蛋白的表达,以及RhoC活性.通过PKN3干扰以及PKN3干扰同时加RhoC过表达,观察HCCLM3细胞运动侵袭能力以及FAK、ROCK2、E-cadherin、Fibronectin蛋白表达的变化.结果:与NHN-HCC组织比较,HN-HCC组织胶原纤维含量与PKN3蛋白表达明显增加(均P<0.05);与软基质中培养的HCCLM3细胞比较,在硬基质中培养的HCCLM3细胞PKN3的基因与蛋白表达明显增加、侵袭运动能力明显增强、RhoC活性明显升高(均P<0.05),后者活性随PKN3表达的抑制而抑制.与对照组细胞比较,干扰PKN3表达后,HCCLM3细胞运动侵袭能力明显降低,FAK、ROCK2、Fibronectin蛋白表达明显下调,E-cadherin蛋白表达明显下调(均P<0.05),而PKN3干扰同时增加RhoC表达,HCCLM3细胞以上变化不明显(均P>0.05).结论:基质硬度增加能上调PKN3-ROCK2信号通路活性,从丽促进HCC侵袭转移,该机制可能是HN-HCC侵袭转移能力较高的重要原因.

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