换一批柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C基因的克隆与表达
Cloning and Expression of Gene Encoding Nonstructural Protein P2C of Cox-sackievirus B4
摘要目的 克隆并表达柯萨奇B4病毒(CVB4)非结构蛋白P2C基因.方法 提取CVB4总RNA,RT-PCR扩增P2C基因,克隆入pUCm-T载体中,进行酶切和测序鉴定.双酶切重组质粒pUCm-T-P2C,将P2C基因片段定向亚克隆至原核表达载体pMAL-C2中,转化大肠杆菌JM109,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物.结果 RT-PCR扩增得到987 bp的基因片段,测序结果与GenBank公布的P2C基因序列一致.pMAL-C2-P2C经双酶切鉴定,证明构建正确.表达的融合蛋白相对分子质量约78 000,表达量约占菌体总蛋白的25%,且具有良好的反应原性.结论 已成功克隆并表达了CVB4 P2C基因,为进一步研究其生物学活性奠定了基础.
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2009-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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