换一批人肝再生增强因子对人外周血单个核细胞增殖的影响及其机制
Effect of Human Augmenter of Liver Regeneration on Proliferation of Human PBMCs and Its Mechanism
摘要目的 探讨人肝再生增强因子(hALR)对人外周血单个核细胞(PBMC)增殖的影响及其机制.方法 梯度离心分离PBMC,将细胞分为正常对照组、刀豆蛋白A(ConA)(5 mg/L)组和ConA(5 mg/L)+hALR(30 mg/L)组,分别培养10 min、30 min、1 h、2 h、4 h后,MTT法检测各组各时间点细胞增殖水平,钙荧光指示剂法检测细胞内游离Ca2+浓度的变化,Western blot 法检测细胞内胞外信号调节激酶(ERK)的磷酸化程度.结果 4 h内,各组细胞的增殖水平差异无统计学意义,但ConA组细胞增殖水平已表现出逐渐升高的趋势.正常对照组细胞内Ca2+浓度在加入Fluo-3/AM后2 h达高峰,ConA组1 h达高峰,ConA+hALR组10 min达高峰.正常对照组细胞内磷酸化的ERK随培养时间的延长而逐渐减少;ConA组细胞内磷酸化的ERK在30 min达高峰,之后逐渐降低;ConA+hALR组细胞内磷酸化的ERK在2 h前明显低于ConA组.结论 hALR可能通过影响细胞内Ca2+憾度的变化峰值和磷酸化的ERK,来抑制人PBMC的免疫功能,从而影响其增殖.
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