广西圆斑蝰蛇毒凝血因子X激活剂的分离纯化及其止血作用的研究
Purification and Haemostatic Effect of Factor X activator from venom of Vipera russellii in Guangxi
目的 从广西圆斑蝰蛇毒中分离纯化凝血因子X激活剂(factor X activator of Russell's viper venom,RVV-X)并研究其止血作用.方法 应用阴离子交换色谱和凝胶过滤从广西圆斑蝰蛇毒中分离纯化RVV-X,以复钙化时间进行活性鉴定,以SDS-PAGE测定纯度和分子量.观察RVV-X对家兔肝脏创伤出血模型出血时间及出血量,家兔和肝素化小鼠凝血时间的影响.结果 广西圆斑蝰粗毒经阴离子交换色谱获得六个蛋白峰,将RVV-X所在第V峰用凝胶过滤获得的组分A为RVV-X纯品,其凝血活性具有钙依赖性.SDS-PAGE非还原性条件下呈单一蛋白条带,分子量约为97.8kDa,还原性条件下呈二蛋白条带,为一条重链(约76.3kDa)和一条轻链(约21.5kDa).RVV-X可显著减少家兔肝脏切口的失血量,缩短切口出血时间;能显著缩短家兔及肝素化小鼠凝血时间.结论 用层析方法从广西圆斑蝰蛇毒中分离得到的凝血因子X激活剂具有较强的止血活性.
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